题目内容：
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图8、9中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。
问题：
（1）一个图8所示的质粒经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。
（2）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是________。
（3）与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止________。
（4）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
（5）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是________。
答案解析：